产品组成

注意：：由于本产品灵敏度较高，若检测蛋白浓度较丰，会出现过曝反白现象，解决方式详见FAQ说明。

储存条件

避光储存4℃，保质期2年

产品简介

超敏型ECL化学发光技术是基于鲁米诺（Luminol）或者其衍生物（异鲁米诺等）的技术体系。Western荧光检测试剂ECL免疫印迹化学发光溶液是一种旨在通过非放射性（辣根过氧化物酶）发光系统，检测固定在固相膜上（如NC、PVDF等）低至飞克级的微量蛋白，经X光片（放射自显影片）感光或记录化学发光成像仪其免疫印迹的实验辅助试剂。

产品特点

1、超高灵敏度：更容易获得检测信号，检测低丰度蛋白（飞克级）效果更佳；

2、信号稳定：信号膜显色4h后，仍可获取信号；

3、操作简便：提升稀释后抗体的保存时间，并可重复多次使用；

4、兼容性高：适配PVDF膜和NC膜；

5、性能稳定：4℃保存2年，显色效果无差异；

6、检测方法通用：可用X光胶片和化学发光成像仪检测。

适用范围

本试剂盒适用于Western Blot等基于HRP标记的抗体的蛋白印迹检测。

注意事项

1. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。

2. 为获得最佳的实验结果，需要您优化您的所有实验要素，包括样品数量，抗体浓度，膜和封闭剂的使用。

3. 按照1:1的比例混合两种底物组分，制备底物工作溶液A液和B液在吸取过程中请注意更换枪头。

4. 超敏型ECL化学发光液（飞克级）的荧光持续时间很长，但在显色30分钟进行压片或成像，效果最佳。

5. 建议每1cm²大小的膜对应0.1-0.2 mL XKL超敏型ECL化学发光液（飞克级）。例如一张4孔膜滴加100μL-200μL

发光液，一张15孔的膜，滴加500μL-1000μL发光液。

6. A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。

7. 各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。购买的大包装建议分装，减少与空气接触的时间。使用前，上下摇晃混匀，获得最佳效果。

使用方法

1. 常规电泳、转膜、HRP 标记抗体孵育、洗膜。推荐使用XKL增强型抗体稀释液（XKL0912）稀释抗体。

2. 抗体孵育结束后稀释的抗体应立即存放在4℃，以便于后续重复使用。在洗涤膜上的HRP标记二抗的同时，新鲜配制发光工作液，按1:1比例混合两种试剂，制备工作液。

3. 如果印迹膜尺寸为1cm²，建议使用0.1-0.2mL的XKL超敏型ECL化学发光液（飞克级）。例如一张4孔膜滴加100μL-200μL 发光液，一张15孔的膜，滴加500μL-1000μL发光液。

4. 将超敏型ECL化学发光工作液（飞克级）滴加在膜上，孵育1-5分钟。

5. 用镊子将膜夹起，将膜的下缘与滤纸轻轻接触以除去膜上多余的发光液。用透明塑料包装覆盖印迹膜。

6. 使用X光胶片曝光或者化学发光成像仪拍照。

FAQ:

1. 配制好的发光工作液可以重复使用吗？

A: 不建议多次重复使用，正确方式为将ECL工作液滴加到膜上，使其均匀覆盖到膜上后上机曝光。

2. 该超敏型ECL在进行显色时，偶尔有过曝反白现象，是什么原因？

A: 该现象是由于蛋白丰度过高，中心部位高浓度HRP将显色底物瞬间消耗完导致的。

建议：

(1) 降低蛋白上样量和一抗、二抗浓度；

(2)减少发光液孵膜时间，缩短曝光时间；

(3) 换成灵敏度较低的ECL显色液。

3. 该显影液的蛋白检测范围是多少？

A: 经我司验证，该显色液在6.25-50 pg蛋白表达量范围内效果最佳。

免责申明：该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。